ВЫДЕЛЕНИЕ И ИССЛЕДОВАНИЕ МОНОМЕРНОГО СОСТАВА ПОЛИСАХАРИДНОГО КОМПЛЕКСА ИЗ ТРАВЫ TRIFOLIUM PRATENSE L

А. П. Корж, А. М. Гурьев

ГОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России (г. Томск)

Введение. В настоящее время исследователи всего мира большое внимание уделяют изучению иммунотропной активности растительных полисахаридов. Ранее нами были опубликованы результа ты изучения иммунотропной активности водорастворимых полисахаридов из травы клевера лугового (T. pratense), где было установлено существенное влияние данных полисахаридов на активацию мак рофагов, что указывает на перспективность их дальнейшего изучения в качестве противоаллергиче ского средства [1]. T. pratense семейства Fabaceae используется в народной медицине как отхарки вающее, мочегонное, мягчительное, болеутоляющее средство, при злокачественных опухолях и др. [2]. Известно, что химическая структура полисахаридов (ПС) природного происхождения тесно свя зана с их биологическими свойствами. Начальным этапом изучения структуры ПС является установ ление их мономерного состава.

Целью работы явилось изучение мономерного состава полисахаридного комплекса T. pratense.

Материал и методы. Полисахаридный комплекс (ПСК) выделяли из травы T. pratense методом двукратной экстракции (1:100 мл экстрагента+0,5% рр HCl; нагревание 1 час; отстаивание 24 часа; далее нагревание 1 час) и последующим диализом через полупроницаемую мембрану. Содержание уроновых кислот (УК) определяли карбазолсерным методом [3], в пересчете на кислоту галактуро новую; белка – методом Лоури [4], в пересчете на бычий сывороточный альбумин (фракция V). Раз деление ПСК на фракции проводили на DEAEцеллюлозе (Servacelle DEAE52, США). Моносахари ды идентифицировали хроматомассспектрометрическим методом в виде соответствующих триме тилсилильных производных моносахаридов после предварительного гидролиза 2М кислотой трифто руксусной в течение 5 час при 100 °С.

Результаты. Выход ПСК T. pratense составил 1,5±0,1 %; содержание УК в ПСК − 74,64±0,23%. Общее содержание белка – 0,56±0,01%. При фракционировании ПСК на DEAEцеллюлозе получено 5

основных фракций (PS621, PS622, PS623, PS624, PS625). Полученные фракции охарактеризованы

по содержанию белка, нейтральных и кислых полисахаридов

1,16%

1,58%

2,44%

40,99% 48,98%

13,24%

97,26% 97,56%

59,01% 51,02%

86,76%

по содержанию белка, нейтральных и кислых полисахаридов

1,16%

1,58%

2,44%

40,99% 48,98%

13,24%

97,26% 97,56%

59,01% 51,02%

86,76%

PS621 PS622 PS623 PS624 PS625

нейтра льные ПС кислые ПС белок

Рис. Содержание нейтральных, кислых полисахаридов и белка во фракциях полисахаридного комплекса из травы T. pratense

Из рисунка видно, что фракции PS621 и PS622 представлены преимущественно нейтральны ми сахарами (97,26 и 97,56% соответственно) и содержат минорные количества кислых ПС (1,58 и

2,44% соответственно). Фракции PS623 и PS624 отличаются от других высоким содержанием кис лых ПС (59,01 и 51,02% соответственно). Кроме того, только одна фракция PS621 содержит небольшое количество белка (около 1%), который может находиться как в связанной с полисахаридными

молекулами форме, так и в виде свободной примеси.

Мономерный состав этих фракций показал, что гидролизат PS621 состоит из Dглюкозы

(75.68%), Dгалактозы (20.08%), Dарабинозы (1.84%), Dрамнозы (0.35%) и Dксилозы (0.5%). Гид ролизат PS622 состоит из Dгалактозы (27.97%) и Dглюкозы (72.04%). Основными мономерными звеньями PS623 являются кислота галактуроновая (38.75%), галактоза (33.16%), рамноза (15.52%), ксилоза (4.95%), арабиноза (3.47%) и глюкоза (4.14%). Полисахарид PST4 состоит из галактозы, рамнозы и кислоты галактуроновой в соотношение 1,5:1,4:1. Полисахарид PST5 состоит из галакто зы и рамнозы в соотношении примерно 2,1:1.

Заключение. 1. Установлено, что полисахаридный комплекс T. pratense состоит из 5 основных компонентов (PS621, PS622, PS623, PS624, PS625).

 

2. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семей ства HidrangeaceaeHaloragaceae. – Л.: Наука, 1987. – 326 с.

3. Bitter, T. A modified uronic acid carbazole reaction / T. Bitter, H. M. Muir // Anal. Biochem. – 1962. –

Vol. 4. – P. 330–334.

4. Lowry, O. Protein measurement with the Folin reagent / O. Lowry, N. Rosenbrogh, A. Farr and al. // I.

Biol. Chem. – 1951. – Vol. 1. – P. 265–275.

Материал взят из: Науки о человеке: Сборник статей по материалам XII Российского конгресса молодых ученых с международным участием (Томск, 26-27 мая 2011 г.)