СИСТЕМА «ОКСИДАНТ – АНТИОКСИДАНТ» У КРЫС, ПРИВИТЫХ КАРЦИНОСАРКОМОЙ WALKER256

А. В. Гусев, Е. В. Белобородова, Е. Д. Макаров, И. Д. Акиншин, И. В. Барбашов, Н. В. Самсонова

Научные руководители: др мед. наук, проф. М. Г. Пустоветова, др мед. наук, проф. Е. Н. Самсонова

Новосибирский государственный медицинский университет, г. Новосибирск

Введение. В настоящем исследовании был использован ряд мето дических подходов, позволяющих оценить общую флогогенную актив ность сыворотки крови по ее способности усиливать кислородозависи мую биоцидность лейкоцитов в результате которой активируются про цессы перекисного окисления липидов (ПОЛ). Также были использованы методы, основанные на усилении свободнорадикальных реакций в фи зиологических условиях. Такие реакции в тканях уравновешиваются ак тивностью внутри и внеклеточных антиоксидантов, формируя опреде ленный оптимальный уровень про и антиоксидантного равновесия [1, 2].

Цель и задачи. Установить уровень нарушения корреляции «окси дант – антиоксидант» у крыс с саркомой Walker256 и изучить их состоя ния про и антиоксидантного статуса в сыворотке крови.

Материал и методы. Исследование проводили на крысахсамцах

линии Вистар. Суспензию клеток прививаемой карциносаркомы Walker256 инъецировали в мышцу бедра в дозе 106 клеток. Концентрация бы ла выбрана в соответствии с рекомендациями [3]. Размеры опухоли измеряли штангенциркулем в трех взаимно перпендикулярных направлениях, далее их перемножением определяли объем. Животных держали при фиксированном световом режиме (свет – темнота 12:12) и макси мально стандартизированной окружающей температурой. Для получе ния сыворотки крови крысам проводилась декапитация под эфирным

наркозом с момента перевивки опухоли, на 3и, 7е и 14е сутки иссле дования. Проаксидантную активность (ПОА) сыворотки крови определяли с помощью лейкоцитарных тестов, общую антиоксидантую актив ность (АОА) сыворотки крови определяли с помощью хемилюминометра (ХЛ) по степени торможения суммарной ХЛсветимости, запускаемой 3

% Н2О2. Анализ данных вели на PC CPU Intel PII 750 МГц Celeron в среде Windows по программе SPSS 16.0 и Microsoft Excel версии 2007.

Результаты и обсуждение. Результаты оценки общей проокси дантной активности (ПОА) сыворотки крови интактных крыс и животных с экспериментальной саркомой Walker 256 показали, что среднее зна чение общей прооксидантной активности сыворотки крови интактных крыс составило (0,28 ± 0,003) усл. ед. В динамике развития саркомы

Walker 256 величина общей прооксидантной активности сыворотки крыс

на всех сроках наблюдения достоверно превышала среднее контроль

ное значение. Так, на 3и сутки развития саркомы Walker 256 была от мечена максимально высокая величина общей прооксидантной активно сти сыворотки крови, и в среднем она составляла (0,56 ± 0,01) усл. ед., что в 2,3 раза было выше, чем в контроле (p < 0,01). На последующих сроках наблюдения у крыс с саркомой Walker 256 прооксидантная ак тивность сыворотки крови снижалась: к 7м и 14м суткам наблюдения, а ее средние значения превышали контроль соответственно в 1,6 и 1,5 раза и в среднем составили (0,38 ± 0,005) усл. ед. и (0,33± 0,004) усл. ед. (в обоих случаях p < 0,05). В результате определения вторичных, ста бильных продуктов ПОЛ в динамике развития саркомы Walker 256 был выявлен примерно одинаковый характер изменений содержания мало нового диальдегида (МДА) и диеновых конъюгатов (ДК) в сыворотке кро ви крыс. Так, уровень малонового диальдегида в сыворотке крови крыс контрольной группы в среднем составил (0,06 ± 0,004) нг/мл. В то же время на 3и сутки развития саркомы Walker 256 уровень МДА в сыво ротке крови крыс достоверно возрастал и достигал (0,077 ± 0,006) нг/мл (p < 0,05). Однако, на 7е сутки его содержание было ниже контроля, что не являлось статистически достоверным, а к 14м суткам наблюдения достигало контрольных цифр, а именно (0,039 ± 0,015) нг/мл и (0,056 ±

0,005) нг/мл. Уровень диеновых конъюгатов в сыворотке крови крыс кон трольной группы в среднем составлял (0,39 ± 0,028) нг/мл. Так же как и

МДА, к 3м суткам развития саркомы Walker 256 уровень диеновых конъюгатов в сыворотке крови крыс достоверно возрастал и достиг (0,44

± 0,015) нг/мл (p < 0,05). На следующих сроках исследования уровень диеновых конъюгатов в сыворотке крови постепенно снижался. Содер жание диеновых конъюгатов на 7е сутки развития саркомы Walker 256

в среднем составило (0,41 ± 0,046) нг/мл, а к 14м суткам наблюдения практически не отличалось от контрольных величин –(0,38 ± 0,025) нг/мл. Исходя из вышесказанного, на ранних сроках развития карцино саркомы Walker 256 значительно повышается общая прооксидантная активность в сыворотке крови крыс, что свидетельствует об активации

свободнорадикальных реакций перекисного окисления липидов, кото рые подтверждаются данными определения малонового диальдегида и

диеновых конъюгатов. Среднее значение общей антиоксидантной ак тивности (АОА) сыворотки крови интактных крыс составило (9,6 ± 0,08) усл. ед. В динамике развития саркомы Walker 256 величина общей ан тиоксидантной активности сыворотки крыс на всех сроках наблюдения достоверно была ниже, чем у крыс контрольной группы. На 3и сутки развития саркомы Walker 256 величина общей антиоксидантной активности сыворотки крови была ниже контрольных величин в 1,3 раза и в среднем она составила (7,38 ± 0,06) усл. ед. (p < 0,05). На последующих сроках наблюдения у крыс с карциносаркомой Walker 256 общая антиоксидантная активность сыворотки крови продолжала снижаться. К 7м и

14м суткам наблюдения средние величины общей антиоксидантной ак тивности сыворотки крови крыс с саркомой Walker 256 были ниже кон троля соответственно в 2,4 и 1,6 раза и в среднем составили (4,0 ± 0,03) усл. ед. и (6,0 ± 0,05) усл. ед. (в Окислительный стресс : патологические состояния и заболевания / Е. Б. Мень щикова, Н. К. Зенков, В. З. Ланкин [и др.]. – Новосибирск: АРТА, 2008. – 284 с.

3. Хегай И. И. Влияние экспрессии гена вазопрессина на рост карциносаркомы Walker 256 у крыс / И. И. Хегай, Н. А. Попова, Л. Н. Иванова // Генетика. – 2000. – Т. 42, № 7. – С. 993–995.

Материал взят из: Медикобиологические науки: достижения и перспективы (г. Томск, 10-11 ноября 2011 г.): сборник материалов I Всероссийской научной студенческой конференции