МЕХАНИЗМЫ DOWNРЕГУЛЯЦИИ АЛЛЕРГИЧЕСКОГО ВОСПАЛЕНИЯ С УЧАСТИЕМ РЕГУЛЯТОРНЫХ ТКЛЕТОК

Е. Э. Кремер, Н. А. Кириллова, И. А. Деев

ГОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России (г. Томск)

Введение. Функциональная активность регуляторных Тклеток (Treg) при бронхиальной астме (БА) связана с обеспечением иммунологической толерантности воздухоносных путей или супрессии эффекторного Тh2 ответа при аллергическом воспалении. Большое внимание в настоящее время уде ляют изучению уровней циркулирующих Treg при различных степенях проявления БА. Из различ ных источников литературы известно, что наблюдаемые уровни Treg при аллергическом воспале нии могут отличаться у пациентов в зависимости от возраста и статуса заболевания [2,3]. Настоящее исследование направлено на установление особенностей экспрессии поверхностных и внутриклеточ ных маркеров Treg в периферической крови больных БА различной тяжести с целью выявления клеточных механизмов регуляции иммунного ответа.

Материал и методы. В исследование включены взрослые пациенты с тяжелой (n = 19), сред нетяжелой (n=20) и легкой (n = 12) БА. Диагноз пациентам устанавливали на основании жалоб, данных анамнеза и результатов клинического обследования. Группу сравнения составили 17 здоровых

человек. Периферическую венозную кровь пациентов и здоровых волонтеров собирали утром нато щак в стерильную пробирку с гепарином в объеме 5 мл. Из гепаринизированной крови выделяли мо нонуклеары в градиенте плотности фиколла (пл.1,077 г/см3, ПанЭко, Россия) для последующего им мунологического исследования.

Уровень экспрессии дифференцировочных антигенов Treg оценивали по вариации поверхно стных и внутриклеточных маркеров (CD4+, CD25+, FoxP3+) с использованием соответствующих мо ноклональных антител методом проточной цитофлюориметрии (FACSCalibur, Becton Dickinson, США). Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием программы STATISTICA 6.0.

Результаты и обсуждение. Для объяснения иммунологических регуляторных механизмов уча стия CD4+ Тклеток в патогенезе аллергического воспаления изучали уровень активированных CD4+CD25+ лимфоцитов при БА различной тяжести. Установлено, что относительное содержание активированных CD4+CD25+ Tклеток у больных легкой и тяжелой БА не превышает показатели кон трольной группы, в то время как пациенты со среднетяжелой БА характеризовались повышением уровня CD4+CD25+ в периферической крови. Однако статистически значимых различий между груп пами выявлено не было (табл.).

Таблица

Субпопуляционный состав регуляторных Тклеток у здоровых лиц и больных бронхиальной астмой различной тяжести

Маркеры (%)

Здоровые доноры

(n= 17)

Больные бронхиальной астмой (БА)

Легкая БА

(n=12)

Среднетяжелая БА

(n=20)

Тяжелая БА

(n=19)

CD4+CD25+

41,8 ± 3,8

33,7 ± 2,21

57,62 ± 1,75

37,1 ± 2,56

CD4+CD25high

1,56 ± 0,24

1,19 ± 0,14▲

1,87 ± 0,47**

1,47 ± 0,08*

CD4+FoxP3+

8,1 ± 0,30

3,48 ± 0,42▲

2,58 ± 0,60**

7,57 ± 0,30*

Примечание:

* p<0,05 по сравнению с группой больных легкой БА

▲ p<0,001 по сравнению с группой здоровых доноров

** p<0,05 по сравнению с тяжелой БА

Около 23% клеток от общего числа CD4+ Тлимфоцитов принадлежит к клеткам с фенотипом CD4+CD25high, также обладающим регуляторными способностями [1]. Установлено снижение содер жания CD4+CD25high при легкой БА (р<0,001) по сравнению со здоровыми лицами. При этом у боль ных среднетяжелой и тяжелой БА выявлено повышение CD4+CD25high (р<0,05) в периферической

крови по сравнению с больными легкой БА (таблица 1). Транскрипционный фактор FoxP3 является

ключевым регулятором развития и функционирования Treg. Измерение уровня экспрессии внутри клеточного белка FoxP3 является важным параметром, характеризующим особенности и интенсив ность аллергического воспаления воздухоносных путей. Относительное содержание CD4+FoxP3+ у пациентов с легкой и среднетяжелой БА оказалось достоверно более низким по сравнению со здоро вой группой и тяжелой БА соответственно, что возможно, указывает на нарушение клеточно опосредованных механизмов иммуносупрессии (таблица 1).

Заключение. Легкая БА характеризуется снижением относительного количества CD4+CD25high

Treg по сравнению со здоровыми лицами. У пациентов с тяжелой БА выявлено повышение CD4+FoxP3+ по сравнению с легкой и среднетяжелой БА. Полученные результаты демонстрируют новые научные данные о фенотипических особенностях и уровне Treg в периферической крови при разных степенях тяжести БА, что подтверждает существование иммунорегуляторных механизмов контроля аллергического воспаления с участием Treg.

Список литературы:

1. Baecher Allan C., Brown J. A., Freeman G. J., Hafler D. A. CD4+CD25high regulatory cells in human peripheral blood. // J. Immunol. – 2001. – Vol. 167. – P. 1245–1253.

2. Kasprowicz D. J., Smallwood P. S., Tyznik A. J, Ziegler S. F. Scurfin. FoxP3 controls Tdependent im mune responses in vivo through regulation of CD4+ T cell effector function. // J. Immunol. 2003. –Vol.

171. – P. 12161223.

3. Turk M. J., GuevaraPatino J. A., Rizzuto G. A., Engelhorn M. E., Sakaguchi S., Houghton A. N. Concomi tant tumor immunity to a poorly immunogenic melanoma is prevented by regulatory T cells. // J. Exp.

Med. – 2004. – Vol. 200(6). – P. 771782.

Материал взят из: Науки о человеке: Сборник статей по материалам XII Российского конгресса молодых ученых с международным участием (Томск, 26-27 мая 2011 г.)