ИЗМЕНЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПОД ВЛИЯНИЕМ ЛИНЕЙНОНЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ КАРЦИНОСАРКОМЫ WALKER256 И НА ФОНЕ ПРИМЕНЕНИЯ КОНСЕРВАТИВНОЙ ТЕРАПИИ

Е. Д. Макаров, И. В. Барбашов, Е. В. Белобородова, А. В. Гусев, Н. В.

Самсонова

Научные руководители: чл. корр. РАМН, др мед. наук, проф. А. В. Ефремов, др мед. наук, проф. И. Д. Сафронов

Новосибирский государственный медицинский университет, г. Новосибирск

Введение. Использование химических и физических методов про тивоопухолевой терапии часто способствует увеличению интенсивности свободнорадикальных реакций в организме [2]. В связи с этим целесо образно исследовать особенности изменения состояния антиоксидант ного потенциала на разных этапах экспериментального опухолевого ро ста и под влиянием современных методов терапии.

Цель и задачи. Изучение у крыс с линейнонеспецифической кар циносаркомой Walker256 концентрации жирорастворимых антиоксидантов в сыворотке крови в динамике ее развития и на фоне применения

общей гипертермии (ОГ), циклофосфана и мелатонина.

Материал и методы. Исследование проводили на крысахсамцах линии Вистар. Суспензию клеток прививаемой карциносаркомы Walker256 вводили в мышцу бедра в дозе 106 клеток [3]. Размеры опухоли из

меряли штангенциркулем в трех взаимно перпендикулярных направле ниях. Животных держали при фиксированном световом режиме и задан ной окружающей температуре. Циклофосфан вводился однократно из расчета 25 мг/кг внутрибрюшинно. Мелатонин – 0,3 мг/кг внутрибрюшин но в течение 14ти суток. Разогревание крыс производилось по «Спосо бу экспериментального моделирования общей гипертермии у мелких лабораторных животных» [1]. ОГ, введение циклофосфана и мелатони на начинали с 5х суток введения опухолевых клеток. Крысы были раз биты на контрольную (интактные) и опытные (с карциносаркомой Walker256 в динамике и получавшие ОГ, циклофосфан, мелатонин) группы. Содержание жирорастворимых антиоксидантов (ретинола и αтокоферола) в сыворотке крови определяли методом высокоэффектив ной жидкостной хроматографии. Анлиз данных вели на PC CPU Intel PII

750 MГц Celeron в среде Windows по программе SPSS 16.0 и Microsoft

Exсel версии 1998

Результаты и обсуждение. Рассматривая динамику содержания жирорастворимых антиоксидантов при опухолевой прогрессии следует отметить, что у крыс с карциносаркомой Walker256 в крови уровень α токоферола на 7е и 14е сутки эксперимента был на 57 и 60 % ниже, чем в контроле (p < 0,05). Аналогичная закономерность наблюдалась и

для содержания ретинола, величина которого в крови крыс с карцино саркомой Walker256 на 7е и 14е сутки эксперимента был на 45 и 38 %

ниже, чем в контроле (p < 0,05). Одним из перспективных направлений в противоопухолевой терапии сегодня является общая гипертермия (ОГ). Влияние ОГ на трансмембранный перенос и метаболизм может приве сти к преодолению лекарственной устойчивости и повышению иммуногенности опухоли. Не являясь канцерогенным и мутагенным агентом, ги пертермия может вызвать в опухоли как апоптоз, так и некроз. На фоне применения ОГ у крыс с карциносаркомой Walker256 концентрация жи рорастворимых антиоксидантов в сыворотке крови на протяжении всего эксперимента имела четкую тенденцию к снижению. Так, содержание αтокоферола на 7е и 14е сут. было в 3,3 и 3,7 раза, а ретинола в 1,3 и

2,1 раза ниже значений, определенных у интактных животных (p < 0,05). Причем уровень последнего антиоксиданта в крови у крыс с карциносаркомой Walker256 при ОГ на 14е сут. был достоверно меньше, по сравнению с показателями у этих животных на 7е сут. эксперимента (p <

0,05). Применение циклофосфана у крыс с карциносаркомой Walker256 также сопровождалось уменьшением содержания жирорастворимых ан тиоксидантов в крови. Так, на 7е сут. эксперимента уровень αтокоферола и ретинола был ниже величин в контроле на 49 и 43 % со ответственно (p < 0,05). На 14е сут. эксперимента низкое содержание жирорастворимых антиоксидантов в крови сохранялось, что может быть

связано не только с особенностями опухолевого роста, но и действием

циклофосфана в организме. Известно, что метаболиты циклофосфана индуцируют перекисное окисление липидов, продукты которого наруша ют структуру и функции мембран, что, в свою очередь, способствует ускоренному расходованию антиоксидантов в свободнорадикальных ре акциях. Поэтому обоснованным является дополнительное использова ние в полихимиотерапии опухолей соединений, в частности мелатонина, обладающих антиоксидантным действием. Обнаружено, что мелатонин является более эффективным антиоксидантом, чем глютатион и вита мин Е. Он и его метаболиты (6гидроксимелатонин) беспрепятственно проникают в клетки и защищают нуклеиновые кислоты, липиды и белки от повреждения свободными радикалами. Выявлено также, что мелато нин может ингибировать NOсинтетазу и усиливать экспрессию генов, ответственных за синтез CuZnзависимой СОД. Использование мела тонина у крыс с карциносаркомой Walker256 приводило к сохранению на относительно высоком уровне жирорастворимых антиоксидантов в крови к 7м и 14м сут. эксперимента. Аналогичная закономерность наблюдалась для содержания αтокоферола в крови животных и при со четанном использовании в терапии циклофосфана и мелатонина. Хотя со стороны содержания ретинола наблюдалось уменьшение его концен трации в крови как на 7е, так и 14е сут. эксперимента (p < 0,05). Сход ная закономерность в отношении изменения содержания жирораство римых антиоксидантов в крови животных на протяжении всего опыта наблюдалась у крыс с карциносаркомой Walker256, получавших ОГ, циклофосфан и мелатонин. Так, уровень αтокоферола на 7е и 14е сут. был на 35 и 66 %, а ретинола на 31 и 29 % ниже, чем животных кон трольной группы (p < 0,05). Причем содержание αтокоферола в крови крыс с карциносаркомой Walker256, получавших ОГ, циклофосфан и мелатонин, на 14е сут. было достоверно ниже, по сравнению с показа телями на 7е сут. эксперимента (p < 0,05).

Выводы. Используемые методики противоопухолевой терапии ока зывают различное влияние на динамику содержания жирорастворимых

антиоксидантов в организме экспериментальных животных. Использо вание ОГ и циклофосфана сопровождается снижением уровней αтокоферола и ретинола в крови крыс с карциносаркомой Walker256, до бавление мелатонина к лечению сохраняет их содержание. Одним из перспективных путей повышения эффективности лечения злокачествен ных новообразований может быть сохранение высокой активности анти оксидантной регуляторной системы во внеопухолевых клетках и тканях.

Список литературы:

1. Ефремов А. В., Пахомова Ю. В., Пахомов Е. А., Ибрагимов Р. Ш. Способ экспери ментального моделирования общей гипертермии у мелких лабораторных жи вотных. – патент РФ №2165105. – Бюл. №10. – 2001.

2. Ефремов А. В. Изменение активности перекисного окисления липидов у живот ных с карциносаркомой Walker 256 под влиянием различных методов лечения/ А. В. Ефремов. // Вестн. новых мед. технологий. – 2008. – Т. XV, №3. – С. 2224.

3. Хегай И. И Влияние экспрессии гена вазопрессина на рост карциносаркомы Walker 256 у крыс / И. П. Хегай, Н. А. Попова, Л. Н. Иванова // Генетика. – 2000. – Т.42, №7. – С. 993995.

Материал взят из: Медикобиологические науки: достижения и перспективы (г. Томск, 10-11 ноября 2011 г.): сборник материалов I Всероссийской научной студенческой конференции