ИССЛЕДОВАНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ПЕРОКСИДАЗЫ ХРЕНА ИММОБИЛИЗОВАННОЙ НА МАГНИТНЫХ НАНОЧАСТИЦАХ

О. А. Лыткина, А. Г. Першина

ГОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России (г. Томск)

Разработка гибридных магнитоуправляемых наноконструкций, в которых белковая молекула иммобилизована на поверхности наночастицы, представляет значительный интерес для создания вы сокоэффективных терапевтических и диагностических систем [1].

Целью данной работы было провести иммобилизацию молекулы фермента на поверхности су перпарамагнитной наночастицы и исследовать его функциональную активность. В качестве ядра конструкции использовали покрытые углеродом наночастицы железа [2], поверхность которых была модифицирована оригинальной солью диазония (4карбоксибензолдиазоний тозилатом) несущей кар боксильную группу [3]. В качестве модельного белка использовали фермент – пероксидазу хрена.

Формирования ковалентной связи с белком проводили методом карбодиимидной активации. Полученные конструкции осаждали, используя постоянный магнит, и промывали (не менее 4 раз) после довательно фосфатным буфером и водой.

Формирование комплекса белокнаночастица было подтверждено методом ИКспектрометрии.

В ИКспектре наноконструкции выявляли характерные полосы поглощения пероксидазы при 1640 см1 и 1537 см1 (амид I и амид II) и наночастиц при 550 см1. По данным спектрофотометрии установ лено, что 1 грамм частиц связывает 0,24 мкмоль фермента. Показано, что пероксидаза, иммобилизо ванная на частицах, сохраняла способность катализировать окисление ортофенилендиамина в при сутствии H2O2.

Таким образом, разработан подход к иммобилизации на поверхности наночастиц белковых молекул, без нарушения их функциональной активности.

Список литературы:

1. Tan W. et al. // Med. Res. Rev. – 2004. – V. 24(5). – Р. 621.

2. Ермаков А. Е. и др. // Физ. хим. – 2009. – Т. 83(7). – С. 13381345

3. Постников П. С. и др. // Рос. нанотех. – 2010. – Т. 5(78). – С. 4951

Работа выполнена при поддержке грантов РФФИ 090499114р_офи и Президента РФ МД1276.2010.7.

Материал взят из: Науки о человеке: Сборник статей по материалам XII Российского конгресса молодых ученых с международным участием (Томск, 26-27 мая 2011 г.)