ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ БАКТЕРИАЛЬНОГО ФОТОСИНТЕЗА

Еще в начале прошлого века Соссюр (De Saussure, 1804) впер5 вые дал в химических символах правильное уравнение валовой ре5 акции фотосинтеза, осуществляемого зелеными растениями:

 

СО2 + Н2О органическое вещество + О2. Последовавшее за этим энергичное изучение реакций фотосинтеза

привело человечество к осознанию одного знаменательного положе5

ния: фотосинтез является единственным процессом, препятствующим исчезновению жизни на нашей планете.

Превращение энергии света в энергию химических связей, осу5 ществляемое живой клеткой, равно интересовало физиков, химиков и биологов. И, несмотря на то, что любопытство и усилия, прояв5 ленные учеными в решении ряда вопросов при изучении фотосинте5 за, были вознаграждены великими открытиями, все же мы должны признать, что и в настоящее время знаем об этом удивительном процессе необыкновенно мало, восполняя порой пробелы нашего знания догадками весьма относительной научной ценности. Одна5 ко, кое5что мы знаем уже достоверно.

Что же такое фотосинтез? Вопреки учебным пособиям и следуя

примеру «от противного», важно сразу подчеркнуть, что,

• во5первых, фотосинтез не всегда сопровождается выделением молекулярного кислорода и,

• во5вторых, фотосинтез не всегда осуществляется с потреблени5 ем углекислоты.

Более того, часто фотосинтез может идти в анаэробных условиях, прекращаться при малейших следах кислорода в окружающей среде и даже сопровождаться выделением углекислоты. Так, в природе суще5 ствует относительно большая группа организмов (зеленые и пурпур5 ные бактерии), которая осуществляет фотосинтез в анаэробных условиях, одновременно окисляя соединения серы или многие органи5 ческие соединения. Указанные группы организмов, а также многие сине5зеленые и зеленые водоросли способны при определенных усло5 виях строить клеточные компоненты не только за счет углекислоты, но и за счет целого ряда органических соединений – углеводов, спиртов, органических кислот, аминокислот. Таким образом, уравнение Соссю5 ра отражает лишь частный случай, один из типов фотосинтеза, осуще5 ствляемый высшими зелеными растениями. Правда, масштаб превращений фотосинтеза зеленых растений грандиозен: выделение молекулярного кислорода в атмосферу и связывание углекислоты в молекулы вновь синтезируемых разнообразных органических соеди5 нений играют первостепенную роль в превращениях веществ и элемен5 тов на нашей планете. И все же важно подчеркнуть, что это всего

лишь частный случай, одно из проявлений единого и единственного процесса в природе, который использует фотохимический механизм, преобразующий энергию падающих световых квантов в энергию хи5 мических связей.

Краткое резюме необходимых для последующего изложения зна5 ний относительно некоторых общих черт фотосинтетического про5 цесса можно выразить следующим образом:

Блэкман (Blaсkman, 1905) просто и убедительно показал, что фо5 тосинтез включает в себя две стадии: световую, в ходе которой воз5 никают какие5то нестабильные промежуточные продукты, и после5 дующую, темновую, в ходе которой эти продукты стабилизируются дальнейшими превращениями с участием ферментов. В настоящее вре5 мя, т. е. спустя 60 лет, стало известно, что в течение первой стадии фотосинтеза образуются два важнейших двигателя клеточного синте5 за: восстановленный пиридин5нуклеотид и аденозинтрифосфорная кислота, использование которых в последующих темновых реакциях обеспечивает возможность синтеза всех без исключения клеточных ком5 понентов, а не только углеводов (!), как это обычно отражается в пос5 ле соссюровских, более поздних, но менее удачных уравнениях фотосинтеза. Блестящие исследования Кальвина, удостоенные в 1961 г. Нобелевской премии по химии, расшифровали пути включения уг5 лекислоты и последующего превращения углерода в серии взаимосвя5 занных и самоподдерживаемых реакций, получивших название

«фотосинтетический углерод – восстанавливающий цикл Кальвина». Оказалось, что никакого «особого» пути, присущего исключительно клеткам фотосинтезирующих организмов, в природе не существует. Указанная последовательность реакций «цикла Кальвина» была обна5 ружена у многих хемосинтезирующих бактерий. Таким образом, тем5 новые реакции фотосинтеза оказались, строго говоря, неспецифичными для фотосинтезирующих организмов и, следовательно, утратили зна5 чительную часть привлекательности в глазах исследователей, интере5 сующихся механизмом превращения лучистой энергии в химическую, и, тем самым, значительно сузили ореол уникальности вокруг фото5 синтетического процесса. В настоящее время наиболее верным можно считать осторожное определение фотосинтеза как процесса синтеза клеточных компонентов из различных соединений за счет использо5 вания энергии света, сопровождающегося обязательным окислением разнообразных химических веществ, выполняющих роль донора элек5 тронов (вода – у зеленых растений, соединения серы из проявлений единого и единственного процесса в природе, который использует фотохимический механизм, преобразующий энергию падающих световых квантов в энергию хи5 мических связей.

Краткое резюме необходимых для последующего изложения зна5 ний относительно некоторых общих черт фотосинтетического про5 цесса можно выразить следующим образом:

Блэкман (Blaсkman, 1905) просто и убедительно показал, что фо5 тосинтез включает в себя две стадии: световую, в ходе которой воз5 никают какие5то нестабильные промежуточные продукты, и после5 дующую, темновую, в ходе которой эти продукты стабилизируются дальнейшими превращениями с участием ферментов. В настоящее вре5 мя, т. е. спустя 60 лет, стало известно, что в течение первой стадии фотосинтеза образуются два важнейших двигателя клеточного синте5 за: восстановленный пиридин5нуклеотид и аденозинтрифосфорная кислота, использование которых в последующих темновых реакциях обеспечивает возможность синтеза всех без исключения клеточных ком5 понентов, а не только углеводов (!), как это обычно отражается в пос5 ле соссюровских, более поздних, но менее удачных уравнениях фотосинтеза. Блестящие исследования Кальвина, удостоенные в 1961 г. Нобелевской премии по химии, расшифровали пути включения уг5 лекислоты и последующего превращения углерода в серии взаимосвя5 занных и самоподдерживаемых реакций, получивших название

«фотосинтетический углерод – восстанавливающий цикл Кальвина». Оказалось, что никакого «особого» пути, присущего исключительно клеткам фотосинтезирующих организмов, в природе не существует. Указанная последовательность реакций «цикла Кальвина» была обна5 ружена у многих хемосинтезирующих бактерий. Таким образом, тем5 новые реакции фотосинтеза оказались, строго говоря, неспецифичными для фотосинтезирующих организмов и, следовательно, утратили зна5 чительную часть привлекательности в глазах исследователей, интере5 сующихся механизмом превращения лучистой энергии в химическую, и, тем самым, значительно сузили ореол уникальности вокруг фото5 синтетического процесса. В настоящее время наиболее верным можно считать осторожное определение фотосинтеза как процесса синтеза клеточных компонентов из различных соединений за счет использо5 вания энергии света, сопровождающегося обязательным окислением разнообразных химических веществ, выполняющих роль донора элек5 тронов (вода – у зеленых растений, соединения серы и органические вещества – у пурпурных и зеленых бактерий).

Характер использования органических соединений, вовлекаемых в фотосинтез бактериями, может быть двояким.

1. Органические субстраты используются только в качестве до5

норов водорода (электронов), необходимых для нормальной рабо5 ты фотохимического аппарата.

2. Органические субстраты используются в ходе темновых реак5 ций как источники углерода для построения клеточных компонен5 тов за счет «ассимиляционной силы», образующейся в ходе предшествующей световой стадии. Конкретные пути использования органических субстратов в конструктивных процессах определяют5 ся их химической природой. Они могут быть следующими:

а) восстановительными, если используемое в конструктивных процессах соединение более окислено, чем уровень клеточного ма5 териала (например, включение в метаболизм пурпурных бактерий муравьиной и уксусной кислот). В этом случае в зависимости от структуры субстрата и наличия соответствующего фермента фото5 синтез сопровождается выделением углекислоты в культурах раз5 вивающегося организма. При этом, чем более окислена используемая кислота по сравнению со средним уровнем окисленности клеточно5 го материала. тем больше углекислоты выделяется в окружающую среду (Gaffron, 1933; Van Niel, 1944; Кондратьева, 1956).

б) окислительными, если используемое в конструктивных процес5 сах соединение более восстановлено, чем средний уровень клеточно5 го материала (некоторые спирты и насыщенные жирные кислоты, начиная с пропионовой). В этом случае развитие бактерий обычно сопровождается потреблением углекислоты, которое тем самым как бы «разбавляет» уровень восстановленности «строительного матери5 ала» за счет одновременной мобилизации углерода одного очень вос5 становленного (например, соответствующая жирная кислота) и другого очень окисленного (углекислота) соединения. Предварительная де5 гидрогенизация субстрата с последующим использованием окислен5 ного продукта в процессах синтеза позволяет рассматривать этот случай как «смешанный» тип использования органического субстрата, по5 скольку органическое соединение вовлекается в фотосинтез сначала в качестве донора водорода (электронов), а затем продукт его окис5 ления становится для клетки подходящим строительным материалом. В результате в развивающихся культурах фотосинтезирующих бак5 терий наблюдается одновременное расходование из окружающей среды двух источников углерода, которые, как правило, разнятся друг от друга степенью окисленности. Это очень распространенный, наибо5 лее обычный случай бактериального фотосинтеза. Гораздо реже встре5 чается пример другого «смешанного» пути, в ходе которого одно и то же соединение используется в качестве источника углерода и донора водорода (электрона) параллельно 5 без вовлечения продуктов окис5 ления в конструктивный обмен.

Трудность выяснения истинных путей использования некоторых органических субстратов в фотосинтезе возрастает вследствие спо5 собности фотосинтезирующих организмов к плавному переключе5 нию и переплетению звеньев в общей цепи утилизации того или

иного субстрата. Еще более запутывают общую картину использо5 вания соединений углерода в конструктивных процессах одновре5 менная биохимическая мобилизация нескольких (чаще двух) субстратов, один из которых способен использоваться по восстанови5 тельному пути, а другой – по окислительному пути или вовлекается в клеточный метаболизм в качестве донора водорода (электронов). В последнем случае, если восстанавливаемым соединением является уг5 лекислота, единственным вхождением которой в обмен веществ яв5 ляется реакция карбоксилирования, возникает возможность непосредственного карбоксилирования окисляемого соединения (если позволяет его структура) или, какого5либо продукта его ближайше5 го превращения (иногда прямо на продукте окисления).

Потребление углекислоты в культурах фотосинтезирующих бак5

терий независимо от полноты сведений относительно химической природы карбоксилируемого органического субстрата выдвигает воп5 рос о трофности организма. Нет надобности в детальном анализе этого вопроса, поскольку в конструктивном использовании угле5 родсодержащих соединений возможны только три трофические ком5 бинации, соответствующие физиологическим типам питan>порождают мнимые картины физиологичес5 ких типов углеродного питания. Так, если какое5нибудь органическое вещество используется клеткой только в качестве (электронов), а в конструктивный процесс включается только углекислота, то, несмот5 ря на видимое превращение в культуре бактерий органического веще5 ства, перед нами случай автотрофного фотосинтеза. Так, например, пурпурные несерные бактерии Rhodopseudomonas gelatinosa способ5 ны окислять изопропанол с образованием эквимолярных количеств ацетона, используя при этом для синтеза клеточного материала исклю5 чительно углекислоту (Foster, 1944). И, наоборот, если фотосинтези5 рующий организм, не используя органическое соединение в качестве донора водорода (электронов), вовлекает его исключительно в процес5 сы синтеза, например, по окислительному пути, сопровождающемуся выделением углекислоты, или каким5либо другим образом, например, с образованием молекулярного водорода, что приводит к видимым изменениям в среде концентрации неорганических компонентов, – перед нами случай истинного гетеротрофного фотосинтеза. Так, например, зеленые серобактерии Chlorobium limicola используют ацетат, и не5 сколько хуже – глюкозу исключительно в процессах синтеза клеточ5 ных компонентов (Sadler, Stanier, 1960; Stanier, 1961). Или другой пример. Несерные пурпурные бактерии Rhodopseudomonas palustris хорошо развиваются на средах, содержащих в качестве доноров элек5 тронов – соединения серы, а в качестве источника углерода – одну из следующих органических кислот: уксусную, пировиноградную, фума5 ровую, яблочную или янтарную. При этом выделение в среду углекис5 лоты происходит в соответствии со степенью окисленности органических кислот (Кондратьева, 1956, 1963).

Возвращаясь к вычленению важнейших факторов, определяю5 щих тип углеродистого питания при фотосинтезе микроорганизмов, еще раз следует подчеркнуть широкое распространение в природе мезотрофного фотосинтеза. Именно регулирующий фактор (или фак5 торы) определяет степень авто5 или гетеротрофности мезотрофного фотосинтеза как слагаемой векторной величины, варьирующей в зависимости от возраста культуры и условий, ее окружающих.

В настоящее время известно, что при наличии вокруг фотосинте5 зирующей клетки органических соединений, способных составлять различные трофические комбинации, важнейшим фактором, регу5 лирующим порядок их вовлечения и характер использования в био5 химических превращениях, является свет.

Влиянию количества и качества света на трофизм фотосинтези5

рующих микроорганизмов посвящено сравнительно небольшое, и явно недостаточное число работ. Однако рассмотрение света в каче5 стве фактора, обеспечивающего клетку энергией, необходимой для синтеза всех клеточных компонентов из присутствующих в среде углеродсодержащих компонентов различной степени сложности, окисленности и доступности, позволяет выяснить, по крайней мере, направление действия светового фактора. Проще всего и вернее все5 го можно определить направление действия света следующим обра5 зом. Чем меньше энергии получают фотосинтезирующие организмы, тем сильнее проявляется склонность их к гетеротрофному типу усво5 ения соединений углерода. Физиологический смысл этого правила понятен, ибо при автотрофном обмене требуется значительно больше энергии для построения исключительно из углекислоты всех клеточ5 ных компонентов, чем при гетеротрофном, когда используются гото5 вые «строительные агрегаты» – органические соединения. При5 веденное выше правило оказалось справедливым по отношению к общему количеству подаваемой лучистой энергии, а не к способам ее подачи, связанным с особенностями ее поглощения и биологического использования. Так, организмы, обладающие фотоактивными пиг5 ментами с максимумом поглощения в более длинноволновой области спектра и вследствие этого поглощающие более бедные энергией све5 товые кванты, обнаруживают повышенную склонность к гетеротроф5 ному типу фотосинтеза. Действительно, среди пурпурных бактерий, содержащих бактериохлорофилл с максимумами поглощения in vive при 800, 840–860 и 875–5895 ммк, способность к фотогетеротрофно5 му развитию выражена сильнее, чем среди зеленых бактерий, соот5 ветствующие максимумы поглощения бактериовиридина которых лежат in vivo в области 800–810, 740–750 и 665–675 ммк. Способ5 ность к автотрофному образу жизни еще более сильно выражена у сине5зеленых водорослей, содержащих в качестве единственного зе5 леного пигмента – хлорофилл «а» с максимумами поглощения in vivo в области 672–674, 680, 684, 690–695 ммк. И, наконец, «оконча5 тельный» автотрофизм наблюдается у организмов, обладающих по5 мимо хлорофилла «а» другим хлорофиллом – хлорофиллом «b» с максимумом, лежащим in vivo в наиболее коротковолновой области спектра 647–648 ммк. Таким образом, общая тенденция зависимос5 ти трофности микроорганизмов от качества используемого света вы5 ражена в природе достаточно ясно и не может казаться случайной.

С другой стороны, во всех культурах фотосинтезирующих орга5 низмов тенденция зависимости трофизма от количества используе5 мого света выражена в полной мере, если рассматриваемые организмы вообще способны к биохимической мобилизации окружающих угле5 родосодержащих субстратов различной степени сложности. Действи5 тельно, при низких, допороговых, интенсивностях света пурпурные (Максимова, 1958) и зеленые (Федоров, 1964) бактерии, сине5зеле5 ные (Гусев, 1961) и зеленые (Минеева, 1962) водоросли обнаружива5 ют способность к гетеротрофному и мезотрофному типам углеродистого питания. Эти же культуры организмов при повышении интенсивнос5 ти света переключаются на более или даже на чисто автотрофный тип фотосинтеза. Таким образом, одни и те же организмы в природе в зависимости от условий освещения, связанных с местом обитания, временем суток, сезона, могут участвовать в превращениях различ5 ных углеродсодержащих субстратов. Поэтому при широкой экстра5 поляции результатов лабораторных исследований на истолкование роли той или иной группы организмов в круговороте веществ, осуще5 ствляемом в природе, следует проявлять крайнюю осторожность. Всего естественней кажется необходимость отмечать в каждом случае усло5 вия, при которых возможно участие тех или иных организмов в тех или иных превращениях. Такой подход позволяет найти новые ис5 толкования некоторых «загадочных» моментов в биологии фотосин5 тезирующих микроорганизмов. Так, в заключении настоящей работы предложено объяснение известного факта распространения фото5 синтезирующих бактерий в экологических нишах, в которые не про5 никает солнечный свет (почва, толща илов, пластовые воды).

В наших опытах с зелеными серобактериями Chlorobium thiosulfatophilum на среде с одним бикарбонатом, а также с добавле5 нием пролина (или оксипролина) было показано, что интенсивность света от 50 до 2000 лк не влияет на конечный урожай бактериальной биомассы, а лишь изменяет скорость ее нарастания. Сопоставление этого факта с широко распространенной способностью пурпурных и зеленых бактерий к мезотрофному типу углеродистого питания при низкой интенсивности света позволяет, наконец, объяснить распрос5 транение фотосинтезирующих бактерий в местах, исключающих сол5 нечную радиацию. Объяснение предусматривает существование какого5то источника света, пусть очень слабого, но достаточного для осуществления мезотрофного (или гетеротрофного) фотосинте5 за. Таким источником может быть излучение, возникающее при хи5 мических реакциях, сопровождающихся выделением энергии.

В настоящее время известно, что слабая хемилюминесценция в области видимого света и ближнего ультрафиолета имеет место при окислительно5восстановительных реакциях с примерным выходом

105 9 от суммарной энергии реакции. Однако фактический выход

хемилюминесценции может сильно повышаться за счет специфики какого5либо одного или группы процессов, – например, учащения случаев рекомбинации радикалов, образующихся при ферментатив5 ном «переваривании» органических субстратов различной природы (гниение отмершей биомассы) вследствие беспорядочной работы фер5 ментов, освобожденных после деструкции клеток. Таким образом, хемилюминесценция может быть источником видимого света, под5 держивающего активность фотосинтезирующих бактерий даже без солнечной радиации.

Резюме

Люминесценция кристаллических пород (или кристалликов оса5 дочных пород) в видимой области под воздействием жестких излу5 чений радиоактивных элементов, залегающих в толще земной коры, может быть привлечена для объяснения широко известного факта присутствия фотосинтезирующих пурпурных бактерий Chromatium (сем. Thiorhodaceae) в пластовых водах, поднятых с глубины 1700 м (Володин, 1935; Малышек, Малиянц, 1935). Возможно, в данном случае мы имеем дело с новым и своеобразным «биологическим де5 тектором», указывающим местоположение радиоактивных пород.

Physiological properties of bacterial photosynthesis

Summary

Some peculiarities of green and purple bacteria are described characteristic of the type of bacterial photosynthesis and of the specificity of trophic combinations corresponding to the physiological type of carbon nutrition. Cases of «pseudo» trophism are considered and the effect of light is discussed as a factor controlling trophicity and biochemical activity of photosynthetising bacteria in nature. Finally an explanation is advanced of the well known fact that photosynthetising bacteria occur in ecological niches entirely cut – off from sunlight (mud strata, stratal waters).

Литература

Володин Н. А. Буровые воды промысла им. Орджоникидзе, окрашен5 ные в розовый цвет // Азерб. нефт. хоз5во, 1935. № 6.

Гусев М. В. Сине5зеленые водоросли // Микробиология, 1961. 30. № 6. С. 1108.

Кондратьева Е. Н. Использование пурпурными бактериями органичес5 ких соединений в присутствии света // Микробиология, 1956. 25. Вы5 пуск 4. С. 393.

Кондратьева Е. Н. Фотосинтезирующие бактерии // М., изд5во АН СССР. 1963.

Максимова И. В. Изменение степени гетеротрофности Rhodop! seudomonas palustris при разных интенсивностях света // Известия АН СССР, 1958. Серия биология. № 2.

Малышек В. Г., Малиянц А. А. Серобактерии в пластовых «розовых»

водах Сураханского нефтяного месторождения // Доклады АН СССР,

1935. 3. № 5.

Минеева Л. А. Влияние интенсивности света на автотрофное и гетерот5 рофное питание Сhlorella vulgaris и Scenedesmus obliquus // Микробио5 логия, 1962. 31. № 3. С 411.

Федоров В. Д. Мезотрофный фотосинтез, осуществляемый серобакте5 риями Chlorobium thiosulfatophilum // Бюлл. МОИП, 1964. Отдел биол.

69. № 3. С. 158.

Blackman F. F. Ann. botany. 1905. 19. P. 281. (cit. Rabinowitch E. Photosynthesis. N. Y., 1945. № 1).

De Saussure N. Th. Recherches chimiques sur la vegetation // Nyon. Paris, 1804.

Foster Y. W. Oxidation of alcohols by non5sulfur photosynthetic bacteria // J. Bacteriol, 1944. 47. P. 355/

Gaffron H. Uber den stoffwechsel der Schwefelfreien Purpurbacterien // Biochem. J. 250. № 1.

Sadler W. R., Stanier R. Y. The function of acetate in photosynthesis by green bacteria // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1960 .46. № 10. P. 1328.

Stanier R. Y. Photosynthetic mechanisms in bacteria and plants development of an unitary concept // Bacteriol. Revs., 1961. 25. №1.

van Niel C. W. The culture, general physiology, morphology and classification of the nun5sulfur and brown bacteria // Bacteriol. Revs., 1944.

8. № 1.

В сб. «Биология синезеленых водорослей», МГУ,1966.

Материал взят из: Изменения в природных биологических системах — В. Д. Федоров